INFECCIONES RESPIRATORIAS AGUDAS VIRALES

OBJETIVOS • Caracterizar a los virus que producen patología respiratoria • Analizar la técnica para detección de antígenos virales

Infecciones respiratorias y agentes etiológicos virales. Sindrome Infección respiratoria alta

Faringitis

Croup

Bronquiolitis

Neumonia

Virus Más frecuentes

Menos frecuentes

Rinovirus Coronavirus Adenovirus Parainfluenza 3

Influenza A o B Parainfluenza 1 o 2 V.R.S Enterovirus

Adenovirus V.Epstein-Barr Enterovirus V.Herpes Simplex

Influenza A o B V.R.S. Parainfluenza 1 y 2 Rinovirus Coronavirus Influenza A V.R.S. Sarampión Coronavirus

Parainfluenza 1,2,3

V.R.S.

Adenovirus Parainfluenza 1 y2 Influenza A o B Rinovirus

V.R.S. Parainfluenza 3 Adenovirus Influenza A

Parainfluenza 1 y 2 Rinovirus V.Epstein-Barr

RINOVIRUS

CORONAVIRUS ADENOVIRUS VIRUS RESPIRATORIOS

BOCAVIRUS PARAINFLUENZA 1, 2 y 3

SINCICIAL RESPIRATORIO METAPNEUMOVIRUS INFLUENZA A y B

• Resfrío común representa un tercio o la mitad de infecciones respiratorias agudas en humanos. • Rinovirus responsables del 30-50% de los resfríos comunes, y coronavirus 10-30%. • El resto es debido a adenovirus, enterovirus, RSV, influenza, y parainfluenza, los que pueden dar síntomas indistinguibles a los que dan rino y coronavirus.

RINOVIRUS

RINOVIRUS

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Virus RNA ss Familia: picornaviridae ácido-lábil > de 100 serotipos.

RINOVIRUS

CORONAVIRUS

CORONAVIRUS Esféricos, Envueltos de 80 a 220 nm Multiplicación: citoplasma, salida por gemación.

Proteínas: Matriz protéica (M), glicoproteína (S) – aspecto de corona solar, nucleocapside (N), hemaglutinina-esterasa (HE). Heterogeneidad antigénica significativa. Reacciones cruzadas antigénica entre cepas humanas y animales.

CORONAVIRUS

BOCAVIRUS HUMANO HBoV Descrito por primera vez en el año 2005 identificado en muestras de aspirado nasofaríngeo en niños con infecciones del tracto respiratorio inferior. Fue descubierto por métodos moleculares. Las secuencias genéticas y el análisis filogenético muestran una estrecha relación de HBoV con dos miembros de la familia Parvoviridae: parvovirus bovino (BPV) y virus minute canino (CMnV), por lo que recibió el nombre provisorio de bocavirus humano (HBoV), “bo” de bovino y “ca” de canino. Se describe una prevalencia de 2,7% a 19% (Suecia) principalmente en niños menores a dos años de edad. Estas diferencias pueden explicarse por la estacionalidad, predominando en invierno, y por las distintas poblaciones de los estudios.

BOCAVIRUS HUMANO HBoV Varios estudios reportan un alto porcentaje de coinfección con otros virus lo que ha llevado a cuestionar su rol como patógeno respiratorio. HBoV y B19V serían los dos únicos miembros de esta familia viral que causan enfermedades en humanos: B19V responsable de eritema infeccioso en niños e hidrops fetal en infecciones intrauterinas y HBoV como agente viral de infecciones del tracto respiratorio, principalmente en niños bajo 5 años de edad.

BOCAVIRUS HUMANO HBoV Los virus de la familia Parvoviridae son de pequeño tamaño (20-26 nm), de simetría icosaédrica y no poseen manto, su genoma está formado por ADN de simple hebra y es dependiente de células en división para la replicación.

BOCAVIRUS HUMANO HBoV

ADENOVIRUS

ADENOVIRUS

Adenoviridae: ADN doble cadena, lineal, asociado a polipéptidos V y VII formando un core. Simetría icosaédrica. Sin envoltura Cápside: 252 capsómeros. 240 Hexones y 12 pentones Cada hexón formado por Polipéptido II

Partícula es estable a pH bajos y resiste secreciones gástricas y biliares. Existen 6 subgéneros con distintos tipos.

ADENOVIRUS

Transmisión por contacto directo Incubación: 2 – 14 días Sindromes de infección respiratoria alta y baja Aislamiento a partir de secreciones respiratorias Fiebre faringoconjuntival Infecciones oculares: 3, 7 y 4. Infecciones intestinales: tipos 3 y 7. Endémico en toda la población durante todo el año Causa epidemias invernales Altamente recidivante

ADENOVIRUS

Tipos de infección • Lítica Muerte celular, ocurre en células mucoepiteliales.

• Latente Virus permanece en las células del tejido linfático (adenoides). Grupos B y C.

• Transformante (Oncogénica) Crecimiento descontrolado de las células infectadas donde ocurre la replicación. Grupo A.

Terapia génica con ADV

PARAINFLUENZA

PARAINFLUENZA

RNA virus, Paramyxoviridae, Género: Paramixovirus Esféricos, pleomórficos por envoltura laxa. Nucleocápside helicoidal con ARN polaridad (–) Genoma no segmentado, genéticamente más estables PROTEINAS: -Glucoproteínas: ubicadas en espículas que contiene actividad de Neuraminidasa y Hemaglutinina. -Proteína de fusión: permite penetración por fusión con la membrana celular -Proteína M: en parte interna virión.

PARAINFLUENZA

Transmisión por contacto directo Aislamiento temprano, se excreta pocos días PI 1 Es la principal causa de crup (laringo-traqueobronquitis) en niños PI 2 manifestaciones clínicas de menor gravedad PI 3 neumonia y bronquiolitis en menores 6 meses Circulan todo el año, habiendo mas casos de 3 en primavera y verano

SINCICIAL RESPIRATORIO

RNA virus, Paramyxoviridae. Género: Pneumovirus Solo afecta al hombre. Provoca formación de sincicios en células. Carece de Hemaglutinina.

SINCICIAL RESPIRATORIO

Transmisión por contacto directo Incubación: 4 – 5 días Reinfecciones durante toda la vida Aislamiento hasta 7 días desde el inicio de síntomas Principal causa de neumonía y bronquiolitis en niños menores de 2 años Patógeno importante en inmunocomprometidos Causa de epidemia de neumonías en ancianos hospitalizados Causa brotes estacionales todos los años

SINCICIAL RESPIRATORIO

METAPNEUMOVIRUS hMPV

METAPNEUMOVIRUS hMPV

• Subfamilia: Pneumovirinae.

• Género: Metapneumovirus. • Aislado por primera vez en 2001 en Holanda. • Responsable de un 5% de las infecciones respiratorias en niños menores de 5 años.

• Es uno de los 1ros o 2dos microorganismos más frecuentemente aislados. • Se presenta en coinfección con RSV.

METAPNEUMOVIRUS hMPV

Clínica • • • • • •

Infecciones respiratorias altas Otitis media Laringotraqueobronquitis Bronquiolitis Neumonia Posibilidad de neumonias fatales en transplantados.

INFLUENZA

INFLUENZA

INFLUENZA

INFLUENZA

RNA virus, Orthomyxoviridae Genoma segmentado en 8: cadena lineal y polaridad positiva

INFLUENZA

PROTEINAS .HEMAGLUTININA: glicoproteína superficial. Necesita de un clivaje postraduccional por acción de una endoproteasa y carboxipeptidasa (huésped) para activarla. Funciones: infectividad, fusíón, hemólisis. Responsable hemoglutinación.

INFLUENZA

.NUCLEOPROTEINA: antígeno específico de grupo: A, B, C. .NEURAMINIDASA: glicoproteína superficial. Cabeza cuadrangular con 4 subunidades globulares y un vástago que penetra en membrana viral. Cataliza el clivaje entre ác siálico y residuo azúcar, transporta el virus a través de mucinas para permitir la salida de la progenie viral. Estimula producción de Ac’s. Previene la agregación viral.

INFLUENZA

INFLUENZA

• PROTEINA M: de matrix o membrana, asociada a parte interna de membrana viral. Brinda estabilidad al virión y participa del ensamble del mismo. Antígeno específico de tipo. • PROT NO ESTRUCTURALES: NS1-NS2 no se incorporan al virión, se desconoce su función. • LIPIDOS • HIDRATOS DE CARBONO

INFLUENZA

REPLICACION

INFLUENZA

PATOGENIA Transmisión por aerosoles y contacto directo Incubación: 1-4 días Replicación en células de tráquea y bronquios Infecciones agudas autolimitadas por lo general

INFLUENZA Patogenia

Mucosa epitelial sana

Mucosa epitelial infectada con Influenza A

INFLUENZA

Tipo A: Afecta hombre y equinos, porcinos, focas, aves domésticas y silvestres. Enfermedad moderada a severa Produce pandemias y epidemias Existen dos subtipos circulantes H3N2 y H1N1 Tipo B: Enfermedad más leve o similar No tiene subtipos Asociado a Sind de Reyé en niños Tipo C: Mayoría de casos subclínicos

INFLUENZA

INFLUENZA

Estacionalidad: de mayo a octubre Adultos: Comienzo agudo, fiebre hasta 41° C, cefalea, mialgias, dolor de garganta, tos seca, rinorrea, dolor ocular.

Niños: Convulsiones febriles en un 10% Es mas prominente manifestac. gastrointestinales: dolor abdominal, vomitos, diarreas Otras manifestaciones: otitis media, crup, mareo delirio, bronquiolitis

INFLUENZA

COMPLICACIONES: - RESPIRATORIAS: neumonía viral primaria, neumonía bacteriana secundaria y neumonía mixta. - NEUROLOGICAS: encefalitis, polineuritis, Guillen Barré, sindrome de Reyé, convulsiones. - CARDIACAS: alteraciones funcionales.

VARIACION ANTIGENICA

MAYORES: SHIFT Solo descriptas para tipo A. Cambios en genes que codifican HA y NA. El virus aparece con HA y/o NA diferente al que circuló antes. Causan pandemias. MENORES: DRIFT Afecta a tipo A y B. Se producen de manera gradual cada 2 a 3 años dentro de un mismo tipo o de un subtipo. Mutaciones en el ARN viral que se traducen en cambios en AA en los polipéptidos.

VARIACION ANTIGENICA

DRIFT

SHIFT

DIAGNOSTICO de INFECCIONES RESPIRATORIAS AGUDAS VIRALES

ADENOVIRUS

PARAINFLUENZA 1, 2 y 3 VIRUS RESPIRATORIOS

SINCICIAL RESPIRATORIO

PARAMYXOVIRUS

METAPNEUMOVIRUS INFLUENZA A y B

ORTOMYXOVIRUS

MUESTRAS ASPIRADOS NASOFARINGEOS HISOPADO NASAL Y FARINGEO LAVADO BRONQUIOLAVEOLAR No mas de 7 días de instalado el cuadro Muestras refrigeradas y enviadas con normas de Bioseguridad!!!!

ASPIRADO NASOFARINGEO Detección de Antígenos

ELISA

Detección de Ac. Nucléicos

PCR

Centrifugación 10 min

Inoculación en cultivos celulares

Sobrenadante Pellet células

Hep-2

Impronta

MDCK

Incubación 11 días a 33-35°C

Identificación por IF

RSV Adenovirus Influenza A y B Parainfluenza 1, 2 y 3 Metapneumovirus

INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA

CELULAS INFECTADAS ANTIGENO VIRAL ANTICUERPOS MONOCLONALES MARCADOS CON FLUORESCEINA

INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA CELULAS INFECTADAS ANTIGENO VIRAL

ANTICUERPO MONOCLONAL ESPECIFICO

ANTICUERPO ANTI IgG HUMANA MARCADA CON FLUORESCEINA

Circulación Virus respiratorios Corrientes 2013

http://www.grog-argentina.org/grog/home/home.jsp?siteCode=GROG_LOCAL_ARGENTINA

BIBLIOGRAFIA: - Carballal Oubiña “Virología Clínica” -Shors “Virus. Estudio orientacion clinica”.

molecular

•http://www.tulane.edu/~dmsander/garryfavweb.html

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