CONTROL INSTRUMENTAL

Dra. Samantha Cardozo

La mayoría de los análisis en los laboratorios bioquímicos se realizan por algún tipo de instrumento.

INSTRUMENTO: Sistema compuesto por unidades de bloque, en el que una señal analítica (que no suele ser detectable o medible directamente por el ser humano), es traducida y procesada para generar una lectura específica. Ej. de instrumentos: espectrofotómetros UV – Visible, fotómetro de llama, cromatógrafo de gases. Ej. de instrumentos automatizados o autoanalizadores: contador hematológico, autoanalizador clínico, analizador de pH y gases en sangre.

APARATO: Equipo necesario para la conservación, preparación y acondicionamiento de las muestras y reactivos. No proporciona una lectura relacionada específicamente con la señal analítica generada por el analito en estudio.

Ej. de aparatos: Termómetros, estufas, baños termostatizados, etc.

COMPONENTES BÁSICOS DE UN INSTRUMENTO PARA ANÁLISIS CLINICO:

GENERADOR DEL SENSOR

Sistema nebulizador-quemador-llama Atomo basal átomo excitado Sistema monocromador

Analito

SEÑAL ANALITICA

DETECTOR (Transductor de señal)

Señal de entrada (Transducida)

Fotones de radiación electromagnética (Re)

PROCESADOR DE SEÑALES

Fototubo: Re en corriente eléctrica

Medidor o escala

DISPOSITIVO DE LECTURA Registrador Unidad digital

Amplificación de la señal Filtrado del ruido

Señal de salida (Procesada)

Monitor impresora

CONTROL INSTRUMENTAL Algunas de las preguntas que nos debemos formular respecto a un instrumento:................ ¿Hice una selección adecuada del instrumento que voy a utilizar? ¿Tiene plaqueta de interfase? ¿Tiene software? ¿Me solucionará el problema analítico? Servicio Técnico, ¿dispondré del mismo cuando lo necesite? Los insumos ¿Los conseguiré facilmente? ¿Me asesoré respecto a las condiciones físicas que necesita el instrumento? Al recibir el instrumento en le Laboratorio, ¿controlé el estado del mismo? ¿Tiene el Manual?

CONTROL INSTRUMENTAL Antes de comenzar::................ ¿Qué conozco del instrumento que debo controlar?????

LEER DETALLADAMENTE EL MANUAL DEL INSTRUMENTO

Clasificación del Instrumental • Equipos de servicios generales – No se utilizan para realizar mediciones o con influencia mínima sobre las mismas. (material de vidrio no volumétrico, sistemas de acondicionamiento, etc.) • Instrumentos Auxiliares – Material volumétrico manual o automático, termómetros, Baños termostáticos, Estufas de cultivo • Instrumentos Analíticos – Instrumental de inmunoanálisis, contadores celulares, espectrofotómetros, etc. • Ordenadores y Procesadores de datos – Con fines de automatizar tareas técnicas de la instrumentación analítica

Objetivos del Mantenimiento y Control del Instrumental • CONFIANZA – Minimiza la incertidumbre en nuestras medidas y nos facilita la toma de decisión.

• EXACTITUD – Es un parámetro que evalúa el grado de correlación entre nuestra medición y el valor real del analito.

• PRECISIÓN – Es un parámetro que evalúa el grado de reproducibilidad de datos, entre medidas replicadas de una misma muestra homogénea.

Gestión del Instrumental • Calibración Validación o Certificación

• Calificación • Mantenimiento – Preventivo – Correctivo

¿Cómo y para qué validar ? • Consiste en realizar una serie de verificaciones y ensayos sobre un instrumento para asegurar que cumple con las especificaciones de: • diseño • instalación • operación

• Cuando validamos un instrumento nos estamos evitando problemas durante su operación y prevenimos repercusiones no deseadas en la calidad del producto que elaboramos.

CALIFICACIÓN DE EQUIPOS

Establece que…

“el equipo y los materiales fungibles comprados que afecten a la calidad del servicio no deben utilizarse hasta que se haya verificado que cumplen las especificaciones o requisitos normalizados definidos por los procedimientos correspondientes. Esto puede conseguirse examinando muestras para control de la calidad y verificando que los resultados son aceptables. La documentación de la conformidad del proveedor con su sistema de gestión de la calidad también puede utilizarse para la verificación”.

CALIFICACIÓN DE EQUIPOS La CALIFICACIÓN es el proceso documentado por el que un equipo o parte de él aparece como correctamente diseñado, instalado y operativo. Es el procedimiento mediante el cual se establece que un equipo es conforme con los requisitos especificados.

CALIFICACIÓN DE EQUIPOS La calificación brinda evidencias de que los equipos son capaces de operar en forma homogénea y reproducible dentro de los límites y tolerancias preestablecidas. PRECISIÓN EXACTITUD

PROTOCOLO DE CALIFICACIÓN a- Calificación del diseño. Design Qualification (DQ) b- Calificación de la instalación. Installation Qualification (IQ) c- Calificación de operación o funcionamiento. Operation Qualification (OQ)

d- Calificación de la operatividad o del desempeño. Performance Qualification (PQ)

A- CALIFICACIÓN DEL DISEÑO

Adecuación de los procesos y equipos vigentes según diseño y especificación

B- CALIFICACIÓN DE LA INSTALACIÓN

Es la verificación de que los equipos y componentes auxiliares se han instalado conforme a especificaciones del diseño.

ESTABILIDAD

MANTENIMIENTO

DOCUMENTACIÓN

C- CALIFICACIÓN DEL FUNCIONAMIENTO

Mediante la calificación del funcionamiento se verifica y documenta la puesta en marcha del equipo, conforme a las especificaciones de operación, así como que funcionen sus indicadores y opere en los rangos declarados o solicitados.

D- CALIFICACIÓN DEL DESEMPEÑO, OPERATIVIDAD O APTITUD Evalúa el funcionamiento adecuado del equipo, conforme a los parámetros requeridos por el laboratorio.

Se realiza a su recepción, tras la calificación satisfactoria de la instalación y funcionamiento y antes de su puesta en servicio. HISTORIAL DEL EQUIPO

Mantenimiento • Requiere de: – – – – – –

Planeamiento (Cuándo, cómo, quién). Repuestos (cuáles, cuántos, originales, adaptados) Herramientas (específicas) Mano de obra (calificada) Procedimientos (estandarizados) Documentación (registros)

Mantenimiento preventivo • Sirve para identificar precozmente fallas, defectos o desgastes en el instrumento que pueden afectar a la operabilidad del instrumento en el futuro inmediato • No elimina la contratación de personal de mantenimiento o de los servicios de mantenimiento • Pretende un uso racional del servicio contratado

Requerimientos mínimos • Desarrollar planes para cada instrumento de acuerdo con sus características e instrucciones del fabricante • Programar el mantenimiento preventivo de cada instrumento de acuerdo con la intensidad de su uso y al diagrama operativo del servicio • Controlar el inventario de repuestos y planificar el stock de acuerdo con la demanda específica

• Capacitación continua de los operadores y los supervisores para la ejecución eficaz del plan

Beneficios del Mantenimiento • Sobre el sistema – Genera mayor confianza en el instrumento – Decrecen los problemas de calidad

• Sobre el instrumento – Prolonga su vida útil – Aumenta la capacidad operativa

• Sobre el gerenciamiento del recurso – Disminuye los costos operativos

CONTROL DE CALIDAD DE FOTOMETROS Y ESPECTROFOTOMETROS 1

 CONTROL DEL TIEMPO DE ESTABILIZACIÓN ELECTRÓNICA  CONTROL DEL CERO MECANICO  CONTROL DE CERO ELECTRICO  CONTROL DE LA EXACTITUD FOTOMETRICA

CONTROL DE CALIDAD DE FOTOMETROS Y ESPECTROFOTOMETROS 2  CONTROL DE LA PRECISION FOTOMETRICA  CONTROL DE LA LINEALIDAD FOTOMETRICA

 EXACTITUD DE LA LONGITUD DE ONDA. CONTROL DEL CENTRO DE BANDA  CONTROL DE LA ESTABILIDAD FOTOMETRICA: DERIVA, RUIDO

CONTROL DE CALIDAD DE FOTOMETROS Y ESPECTROFOTOMETROS 3 CONTROL DE LUZ ESPUREA O PARASITA CONTROL DE ANCHO DE BANDA RESOLUCIÓN DE LONGITUD DE ONDA CONTROL DE CUBETAS

CONTROL DEL TIEMPO DE ESTABILIZACIÓN ELECTRÓNICA

Es el tiempo necesario y suficiente para que todos los componentes electrónicos y ópticos logren condiciones de estabilidad

•Se realiza en todo instrumento que su medición se fundamente en la absorción de radiación electromagnética •Debe realizarse periódicamente o después de reparaciones, cambio de lámparas, etc.

CONTROL DEL CERO MECANICO

Es el cero del galvanómetro o del instrumento de lectura del fotómetro o del espectrofotómetro, sin encender (en reposo)

•Se realiza en los equipos analógicos (con aguja) •Debe realizarse periódicamente, puede hacerse cada vez que se va a encender el equipo

CONTROL DEL CERO ELECTRICO

Es el cero del detector del fotómetro o del espectrofotómetro, no hay señal de salida con el instrumento encendido

Debe realizarse periódicamente, diariamente al encender el equipo o cada 30 minutos si fuese necesario.

CONTROL DE LA EXACTITUD FOTOMETRICA Es la capacidad que tiene el instrumento de indicar la absorbancia o trasmitancia de una solución, y que ésta no tenga diferencias significativas con la absorbancia o trasmitancia real. •Se realiza en todo instrumento que su medición se fundamente en la absorción de radiación electromagnética •Debe realizarse periódicamente, cada 6 meses como mínimo o después de reparaciones, cambio de lámparas, etc. •Debe contarse con un estándar de absorbancia que, entre otras consideraciones: - Tenga un valor estable a una longitud de onda - No varíe con el ancho de banda del instrumento - Sea estable en el tiempo

CONTROL DE LA PRECISION FOTOMETRICA Es el grado de concordancia entre las absorbancias de una solución obtenidas de una misma forma •Una medida espectrofotométrica comprende 3 etapas: - ajuste del 0 % de T - ajuste del 100 % de T - medida del % de T con una muestra colocada en la trayectoria de radiación Por ende, las causas que afectan la precisión de la medida depende del ruido asociado a cada una de estas etapas •Se realiza en todo instrumento que su medición se fundamente en la absorción de radiación electromagnética •Debe realizarse periódicamente o después de reparaciones, cambio de lámparas, etc.

CONTROL DE LA LINEALIDAD FOTOMETRICA Es la capacidad del espectrofotómetro de dar respuestas linealkes a cambios crecientes o decrecientes en la concentración de una sustancia que cumple la Ley de Beer

•Generalmente se realiza entre 360 y 405 nm •Permite conocer el rango de absornacis dentro del cual un espectrofotómetro produce respuetas proporcionales a los cambios de concentración de una sustancia •Una de las principales causas de pérdida de linealidad fotométrica es la presencia de luz parásita

CONTROL DE LA LONGITUD DE ONDA O CONTROL DEL CENTRO DE BANDA Se define como la diferencia entre la  seleccionada y la  entregada realmente por el instrumento. Si existe tal diferencia se llama desplazamiento o corrimiento de la longitud de onda y se mide en nanómetros •Debe controlarse periódicamente, mínimo cada 6 meses.

•Metodo del punto isosbéstico (longitud de onda a la cual los dos formas isoméricas de una sustancia, en concentraciones equivalentes, tienen igual absorbancia)

CONTROL DE LA ESTABILIDAD FOTOMETRICA: DERIVA Y RUIDO La estabilidad fotométrica se define como la variación del cero electrónico del instrumento en función del tiempo La deriva es una inclinación hacia una lectura más alta o más baja a lo largo del tiempo. El ruido se detecta en la falta de estabilidad en las lecturas de la absorbancia

•Todo instrumento debe estar conectado a un estabilizador de tensión y una buena conexión a tierra.

CONTROL DE LUZ ESPUREA O PARASITA Se define luz parásita a toda radiación que alcance el detector sin haber pasado a través de la cubeta

El error por luz espúrea es mayor cuanto mayor sea la cantidad de luz que se filtra y cuanto mayor sea la Absorbancia.

•Debe controlarse al instalar el equipo y después de reparaciones, cambio de la fuente (lámpara), cubeta o porta cubeta.

CONTROL DEL ANCHO DE BANDA Ancho de banda () es el conjunto de longitudes de onda seleccionadas por el monocromador Cuanto menor sea el  seleccionado, mejor la calidad del monocromador. En general, el ancho de banda del monocromador debe ser 10 veces menor que el anch de banda del pico de absorción de la sustancia a determinar. •Debe controlarse al instalar el equipo y después de reparaciones, cambio de la fuente (lámpara).

RESOLUCION DE LONGITUD DE ONDA La resolución o poder de resolución, es la aptitud para distinguir, como entidades separadas, aspectos espectralesadyacentes, como las bandas de absorción o las líneas de emisión.

R=/d : es la longitud de onda media entre dos lineas resueltas d : es la diferencia de longitudes de onda entre líneas •Debe controlarse al instalar el equipo y después de reparaciones, cambio de la fuente (lámpara).

CONTROL DE CUBETAS Las cubetas son los recipientes que contienen las soluciones a medir. Pueden ser de: Cuarzo para UV Vidrio para visible Poliestireno para visible. •Debe controlarse al utilizarlas por primera vez .

CONTROL DE APARATOS

ESTUFAS TERMOMETROS

BAÑOS TERMOSTATIZADOS HELADERAS Y FREZER

CENTRIFUGAS

CONTROL DE APARATOS

ESTUFAS TERMOMETROS

BAÑOS TERMOSTATIZADOS HELADERAS Y FREZER

CENTRIFUGAS PIPETAS

MANTENIMIENTO Y VERIFICACIÓN DE MICROPIPETAS Las micropipetas son muy utilizadas en los laboratorios. • En forma regular, se las debe someter a un servicio de mantenimiento y calibración. Para un correcto proceso de mantenimiento y calibración, las micropipetas deben ser enviadas a los representantes de las marcas comerciales.

MANTENIMIENTO Y VERIFICACIÓN DE MICROPIPETAS

Estos representantes emiten certificados de calibración que garantizan por un tiempo, el buen funcionamiento del instrumental. En la rutina diaria se puede realizar una inspección rápida y práctica para poner en evidencia el mal funcionamiento de la micropipeta.

MANTENIMIENTO Y VERIFICACIÓN DE MICROPIPETAS Inspección rápida • Apariencia general: • Observar que el pistón superior no esté doblado o corroído. • El dial de los números debe estar alineado y limpio. • El eyector de los tips no debe estar corroído ni quebrado. • El soporte de los tips no debe tener daños físicos ni químicos. • Verificación del funcionamiento: • Seleccionar el volumen máximo y verificar que el pistón se deslice sin fricción. • Verificar que el sistema de eyección funcione correctamente.

Inspección rápida (continuación) • Prueba de pérdida: • Seleccionar el volumen máximo. Colocar un tip. • Aspirar agua. Mantener 20 segundos el líquido en el sistema. • No se debe observar la aparición de gotas en la punta del tip. • Para el caso de pipetas de 2 a 200 µl, sumergir la punta del tip en agua. No se deberá observar disminución del nivel del líquido dentro del tip.

VERIFICACIÓN DEL VOLUMEN PIPETEADO Existen diferentes métodos:

• MÉTODOS GRAVIMÉTRICOS • MÉTODOS COLORIMÉTRICOS • MÉTODOS RADIACTIVOS La norma ISO 8655-6 establece como método de referencia el GRAVIMÉTRICO utilizando agua destilada.

MÉTODOS GRAVIMÉTRICOS (agua destilada o Hg): Se pesa el material dispensado y se realiza la conversión con la densidad del líquido. • MÉTODOS COLORIMÉTRICOS (Soluciones de colorantes) •Se compara la densidad óptica del volumen dispensado. Se debe utilizar una pipeta calibrada como referencia. • MÉTODOS RADIACTIVOS (Soluciones radioactivas) •Se compara la cantidad de cpm del volumen dispensado. Se debe utilizar una pipeta calibrada como referencia.

CONTROL DE TEMPERATURA: Modelo de resultado ENFRIAMIENTO NOCTURNO

Tº C

Registro cada 2 horas

Termostato

Termopar 1 37.60

Tiempo graficado 24 horas

37.06

36.6

Horas

DOCUMENTOS DEL MANTENIMIENTO • ID del Instrumento • Documento de Mantenimiento Correctivo • Documento de Mantenimiento Preventivo

ID DEL INSTRUMENTO – Contiene todos los datos que describen e identifican al documento. • Tipo, descripción, ubicación física, código patrimonial • Fecha de compra, ingreso, puesta en marcha • Garantía, tipo y vencimiento • Servicio técnico y operadores responsables • Plan de mantenimiento preventivo – parámetros, criterios de aceptación, frecuencia • Datos de obsolescencia (fecha, motivo, destino)

DOCUMENTO DE MANTENIMIENTO CORRECTIVO

– Fecha del evento, evento y su descripción, comunicaciones, fechas de salida y reingreso al servicio, comentarios del mantenimiento preventivo, operadores

MANTENIMIENTO CORRECTIVO

FECHA Evento

Comunicación

Repara.

Salida

PARAMETRO FECHA

-Nuevo -Reparado -Mant. Prevent.

Regreso

DESCRIPCION EVENTO

COMENTARIO REPARACION

SOLICITANTE

OPERADOR

RESULTADO ACEPTABLE COMENTARIO SI

RESPONSABLE

NO

MANTENIMIENTO PREVENTIVO

Mes PLANIFICACION ANUAL:

Año

DOCUMENTO DE MANTENIMIENTO PREVENTIVO – Fecha de la acción, parámetro, resultado del chequeo, responsable

REGISTRO DE CONTROLES DIARIOS Y SEMANALES

Fecha

Parámetro

Operador

Result.

Aceptado SI NO

Fecha

Parámetro

Operador

Result.

Aceptado SI NO

Fecha

Parámetro

Operador

Result.

Aceptado SI NO

BIBLIOGRAFIA 1) Cámara, M.; Nepote, J.; Nejman, N. y Gómez Ayet, M.: “CONTROL Y EVALUACIÓN DE LA CALIDAD EN EL LABORATORIO DE ANÁLISIS CLÍNICOS”. Corrientes, 2003. Modulo IV. 2) Sobrero, C. y Malbrán, T.: “CURSO DE ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD EN EL LABORATORIO DE ANÁLISIS CLINICOS”. Resistencia, 2001. 3) PEEC. Fundacion Bioquímica Argentina. 1996 – 2000

4) Mantenimiento del Instrumental y equipamiento. III Encuentro para la integración de la Hemoterapia Nacional – Taller de Capacitación. Paraná – Entre Ríos Noviembre 10,11 y 12 de 2004